中文

新闻中心

新品推荐|卡尤迪核酸清除剂,5分钟轻松解决核酸污染困扰

2022.12.28

核酸气溶胶污染控制一直是分子检测实验室管理面临的最棘手的问题之一,一旦发生污染,不但检测工作要立即停止,而且还要花费大量的人力物力及时间去清理实验室环境,直到确认消除污染后才能恢复工作。


一旦确认发生了核酸气溶胶污染,首先,要查找污染源和明确污染范围。然后,根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施,结合不同方法以达到最佳效果。


应对分子检测实验室污染的最好办法就是防范于未然,今天我们就带大家了解一下实验中如何避免和减少污染的产生以及处理污染


01.实验室污染是如何产生的?


在分子检测过程中常见以下几种污染类型 :


①扩增产物的污染

②基因组DNA的污染

③样本间交叉污染

④阳性质控品污染

⑤其他污染


分子检测实验室的污染主要来源是扩增产物的污染。


PCR扩增产物的污染


扩增产物拷贝量大,极其微量的泄露就可以引起假阳性结果的产生,其形成气溶胶含长短不一核酸片段小颗粒,沉降到操作台面、扩增仪等物体及空气中造成扩增及产物分析区或者实验室大面积的污染。


PCR扩增时由于管内液体“蒸发”导致气溶胶污染


①常见有PCR反应管未盖紧或PCR反应板的封板膜未封紧、反应管与管帽的匹配性不佳、PCR反应管/封板膜的质量不佳等在高温变性中造成气溶胶污染等。


②PCR扩增后反应管处理不当导致气溶污染:如反应结束后扩增反应管未及时清除,误操作打开盖子。


③PCR管在实验区域内高压消毒,导致扩增产物污染等。


PCR产物经35~45 循环的扩增,PCR产物泄漏导致的空气中每个气溶胶分子中所包含的拷贝数约在104~106拷贝,这个拷贝数对应的qPCR检测Ct值在24~30左右!目前核酸检测试剂盒的检测限普遍 ≤ 500 copies/ml,因此即使是极微量的核酸污染也足以能够明显地检测出“阳性”,但最终造成实验结果为“假阳性”。


阳性质控品引起的污染


在常规的检测实验中,频繁地使用阳性对照品或第三方普适性的质控品,可能会导致阳性对照品或质控品引起大范围的环境污染或小范围的阴性样本被污染成“假阳性”


重组质粒作为阳性质控品,发生污染的概率更大;以构建的假病毒或重组病毒作为阳性质控品,参与核酸提取的过程中,也容易发生气溶胶污染。


样本间交叉污染


检测过程中,样本之间可能会发生交叉污染,比如,阳性样本或者实验室所用的质控品污染了本来为阴性的样本,这也会造成“假阳性”。


样本管开盖(尤其是离心、震荡混匀后的开盖)时,易产生气溶胶,污染操作区域(生物安全柜)。开样本管时易污染手套,通过手套再污染其他样本。


吸样/加样过程中,尤其移液枪吸样过急、过快、反复吸样、枪头无滤芯或过短等,均易导致移液枪下端甚至移液枪腔体内污染。


加核酸模板时,由于操作不当、有气泡时或者枪头过短等,可能会污染邻近孔或移液枪污染。


基因组DNA的污染


待提取样本中含有强阳性样本,其提取的样品中含有高浓度的阳性核酸,形成气溶胶,造成污染。


全自动核酸提取仪在提取程序下进行磁珠洗涤(由于加温、多次上下或水平震荡洗涤)时,易形成气溶胶。


气溶胶是由空气与液体表面摩擦而产生的,开盖、晃动反应管及污染加样器的反复吸样都可形成气溶胶,从而导致交叉污染。


以上核酸来源,均形成气溶胶扩散至空气中,或吸附到物体表面。


其他可能的污染来源


①试剂污染导致的“假阳性”。在试剂的配制过程中,接触了污染的容器、移液器、枪头、溶液等物导致试剂被污染。


②设备污染导致的“假阳性”。设备污染主要是仪器接触了PCR核酸模板、阳性对照、扩增产物未清除或无法清除造成的污染,其往往表现为特定的孔位假阳性,同一区域的其他环境监测点(如:操作台面、空气等)多为阴性结果。


DNA在不断地扩增过程中容易造成标本污染、试剂污染、产物污染、设备污染、其他污染或者产生气溶胶污染。需要注意的是,核酸污染物具有长期性和累积性,如果不采取措施很难实现自我降解、自我清除



02.常见的消毒措施并不能有效降解核酸


▷ 紫外灯能杀灭病毒,但是《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》指出,短片段的基因核酸对紫外线损伤不敏感。紫外灯照射对300bp以下的扩增产物无效,荧光定量产物长度一般为80-150bp,所以紫外灯照射对产物核酸没有太大作用。


▷ 酒精能够杀灭病毒,但不能降解核酸,而且它还是核酸提取试剂中的一个组分。


▷ 醛类、酚类、季铵盐等消毒剂虽然能杀灭病毒,但不能降解核酸,或降解效率较差,有的甚至可致基因突变等毒害作用,尽量不要使用。


▷ 已知的消毒剂中,次氯酸盐类消毒剂可以一定程度地降解核酸,但是腐蚀性强,长期使用会对仪器设备的表面造成严重的腐蚀,甚至影响使用寿命。


03.如何有效处理污染?


发生污染时,我们建议应该对污染的区域来源进行区分:空气中的核酸气溶胶污染和吸附到仪器设备上的核酸污染物


▷ 空气中的核酸气溶胶污染处理


紫外线照射无法降解300bp以下的短片段核酸,作用距离以及效果非常有限,并且容易产生处理死角,建议使用核酸清除剂进行雾化清除


▷ 吸附在仪器、设备、耗材表面上的核酸污染处理


通常更换污染区的耗材(主要是吸头和离心管);


实验服、工作服应用次氯酸盐溶液浸泡1小时后,进行洗涤处理;


建议使用核酸清除剂喷洒实验室桌面、地面、墙面,20分钟后用一次性吸水纸或者干净抹布擦拭干净。打开实验室所有紫外灯(生物安全柜、传递窗、实验室等),30分钟后打开通风系统即可解除污染。


COYOTE核酸清除剂


为有效去除分子检测实验室内的气溶胶污染和核酸(DNA/RNA)污染,卡尤迪推出全新产品——COYOTE核酸清除剂。该产品采用生物酶为主要成分,可高效、快速地清除空气中或工作台面、仪器表面等污染,保障使用安全环保,无毒无害,适用于医院检验科PCR实验室、疾控中心PCR实验室、第三方检测机构分子检测实验室、科研机构分子生物学实验室及核酸检测试剂盒生产车间等应用场景,降低核酸分子对PCR实验准确性的干扰,助力受污染问题困扰的实验室、生产车间等快速复工复产。


图片


产品优点


本品的生物酶可在室温条件下非特异性的降解单链及双链的DNA和RNA,将其完全消化成1~5碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸,具有高效水解核酸的能力。


1.作用迅速、耐受性强

5分钟即可清除污染,效果显著。


2.无毒无害、无色无味

无任何腐蚀性,食品级安全。


3.不易残留,适用广泛

适用于工作台及实验室仪器表面、塑料与玻璃器皿表面、移液器表面及环境中DNA和RNA污染。


4.操作简单、轻松使用

配套高效雾化喷壶,雾化细腻均匀。


使用效果

图片


图片


注:A、B、C为市场上在售同类产品,PC为对照组。


使用方法


1.使用本品后,室温静置5分钟,若核酸污染情况比较严重,可延长至20分钟;


2.随后可使用75%酒精静置15分钟或紫外照射30分钟后用清水擦干,可完全停止本品作用。


更多产品详情,欢迎您致电:

18611739800(申经理) 咨询洽谈!


北京卡尤迪生物科技股份有限公司心怀“让每一个人都受益于分子诊断”的企业愿景,自成立以来坚持以原研创新力推动分子诊断POCT技术发展,通过深耕病原微生物的核酸检测技术领域,形成了集研发、生产、销售、检测服务于一体的全产业链布局,旨在为客户提供分子诊断全场景整体解决方案,以先进的分子诊断POCT技术助力中国健康事业发展。


公司要闻